離心濃縮是多肽凍干前處理中常用的步驟,主要針對水溶性多肽(極性氨基酸為主)、分子量較?。?lt; 10 kDa)的線性肽、不含復(fù)雜修飾或二硫鍵的簡單肽。其作用是通過離心力與減壓加熱結(jié)合,高效去除樣品中的溶劑(如水、有機溶劑等),為后續(xù)凍干過程創(chuàng)造更優(yōu)條件。
這一技術(shù)對提升凍干效率、保障多肽質(zhì)量、提升產(chǎn)能具有重要意義。
減少樣品體積,降低凍干負荷
圖1:使用Genevac S3i HT-12快速凍干功能的工藝流程
多肽溶液(尤其是經(jīng)過層析、純化后的樣品)往往體積較大,單個樣品通常在幾十甚至幾百毫升),如果直接使用凍干機,就會導(dǎo)致大量溶劑需要通過升華才能去除,會顯著延長凍干時間,且消耗更多能耗。同樣,若是在未去除有機溶劑的情況下直接進行凍干,會影響最終目標(biāo)樣品的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性。
使用Genevac S3i HT-12溶劑蒸發(fā)濃縮工作站可通過減壓加熱條件對溶劑快速蒸發(fā),將單個上百毫升的樣品濃縮至5ml內(nèi)的西林瓶(甚至可以直接交付凈干產(chǎn)品,取決于產(chǎn)品的工藝要求),大幅減少凍干時間,從源頭降低凍干設(shè)備的負荷。
提高凍干產(chǎn)物純度與穩(wěn)定性
離心濃縮去除揮發(fā)性雜質(zhì)后,凍干產(chǎn)物中殘留的有機溶劑、小分子污染物顯著減少,可降低雜質(zhì)對多肽儲存穩(wěn)定性的影響(如雜質(zhì)可能加速多肽氧化、水解)。
例如:若樣品中殘留乙腈(沸點 81℃),直接凍干時可能因乙腈與水共晶,導(dǎo)致凍干產(chǎn)物出現(xiàn)“潮解”現(xiàn)象,而離心濃縮可將乙腈去除至檢測限以下,避免這一問題。
用Genevac S3i HT-12溶劑蒸發(fā)濃縮工作站濃縮的多肽濃縮液濃度均勻,凍干后更易形成疏松、多孔的 “海綿狀” 結(jié)構(gòu)(而非堅硬結(jié)塊),不僅溶解度更好,還便于后續(xù)復(fù)溶和分裝。
圖2:使用Genevac S3i HT-12快速凍干功能得到的蓬松粉末和普通濃縮得到的干燥產(chǎn)物對比
避免高溫對多肽的破壞,保護生物活性
多肽(尤其是含不穩(wěn)定氨基酸殘基或修飾基團的多肽)對溫度敏感,高溫易導(dǎo)致其氧化、水解或構(gòu)象變化(如變性、聚集)。
離心濃縮全程在減壓低溫條件下進行,樣品溫度始終等于對應(yīng)壓力條件下溶劑蒸發(fā)沸點,避免高溫對多肽的熱損傷,最大限度保留其生物活性和結(jié)構(gòu)完整性。含易氧化氨基酸(如半胱氨酸、甲硫氨酸)可以使用帶氮氣保護功能的型號完成濃縮。
圖3:以96孔板示意防暴沸功效
在Genevac S3i HT-12具有防暴沸技術(shù),在離心濃縮過程中,樣品會受到500G離心力的作用富集到容器底部,高效蒸發(fā)表面溶劑,使直接干燥后的樣品分布均勻,哪怕后續(xù)做小體積凍干也無需擔(dān)心“局部異?!钡膯栴}。
質(zhì)譜分析前的樣品處理
質(zhì)譜分析是多肽研究的重要手段之一。在進行質(zhì)譜檢測前,無論是膠粒蛋白質(zhì)樣品還是溶液蛋白質(zhì)樣品,都需要進行濃縮,因為質(zhì)譜檢測對樣品濃度有嚴(yán)格要求,過低的濃度會導(dǎo)致信號微弱,無法準(zhǔn)確分析多肽的結(jié)構(gòu)和序列。
離心濃縮儀能夠有效除去樣品中的乙腈等有機溶劑,同時將多肽樣品濃縮至進樣小瓶,為質(zhì)譜分析提供高質(zhì)量的樣品。
+
TEGENT
Genevac S3i HT-12
溶劑蒸發(fā)濃縮工作站
英國 Genevac S3i HT系列溶劑蒸發(fā)工作站擁有全新觸摸屏技術(shù)、多層轉(zhuǎn)子設(shè)計與高性能系統(tǒng),充分優(yōu)化蒸發(fā)過程,縮短蒸發(fā)耗時。
● 通量高,一個批次處理最多5L樣品;
● 適用沸點≤220℃各類溶劑(比如DCM、DMF、DMSO、NMP、TFA等);
● 輔助濃縮方案優(yōu)化,一鍵運行。
如果您對上述產(chǎn)品感興趣,可隨時聯(lián)系德祥科技撥打熱線400-006-9696,或點擊下方鏈接填寫表單咨詢。
Genevac
ATS集團是德祥集團資深合作伙伴之一。英國Genevac公司成立于1990年,隸屬ATS SP Scientific旗下,一直專注于研究和生產(chǎn)各種離心蒸發(fā)濃縮設(shè)備,其產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、制藥、化學(xué)、分析等領(lǐng)域。
德祥科技
德祥科技有限公司成立于1992年,總部位于中國香港特別行政區(qū),分別在越南、廣州、上海、北京設(shè)立分公司。主要服務(wù)于大中華區(qū)和亞太地區(qū)——在亞太地區(qū)有27個辦事處和銷售網(wǎng)點,5個維修中心和2個樣機實驗室。
30多年來,德祥一直深耕于科學(xué)儀器行業(yè),主營產(chǎn)品有實驗室分析儀器、工業(yè)檢測儀器及過程控制設(shè)備,致力于為新老客戶提供更完善的解決方案。公司業(yè)務(wù)包含儀器代理,維修售后,實驗室咨詢與規(guī)劃,CRO凍干工藝開發(fā)服務(wù)以及自主產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、售后。與高校、科研院所、政府機構(gòu)、檢驗機構(gòu)及知名企業(yè)保持密切合作,服務(wù)客戶覆蓋制藥、醫(yī)療、商業(yè)實驗室、工業(yè)、環(huán)保、石化、食品飲料和電子等各個行業(yè)及領(lǐng)域。
2009至2021年間,德祥先后榮獲了“最具影響力經(jīng)銷商”、“年度最佳代理商“、”年度最高銷售獎“等殊榮。我們始終秉承誠信經(jīng)營的理念,致力于成為優(yōu)秀的科學(xué)儀器供應(yīng)商,為此我們從未停止前進的腳步。
我們始終相信,每一天都在使這個世界變得更美好!